MK体育(官方)网站

ELISA试剂盒特殊的包被方式
点击次数:1077 更新时间:2016-08-23

ELISA试剂盒特殊的包被方式


其后 通过抗原抗体反应使抗原固相化。此间接结合在固相上的抗原远离载体表面,其抗原决定簇也得以充分暴露。间接包被的抗原经固相抗体的亲和层析作用,人elisa试剂盒包被在固相上的抗原纯度大大提高,因此含杂质较多的抗原也可采用捕获包被法,试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。间接包被 的另一优点是抗原用量少,仅为直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯载体上的非蛋白质抗原可采用。例如,在检测抗DNA抗体时,需用 DNA作为包被抗原,而普遍的固相载体一般不能直接与核酸结合。
方法二 用于检测未知抗体的间接法: 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。

人ELISA试剂盒加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被的反应孔
中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,
37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。

其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

将 抗原或抗体固定在过程称为包被。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子 结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用。这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、人ELISA试剂盒浓度等的影响。载体对不同 蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,因此更易吸附到固相载体表面。IgG对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附 力,其联结多发生在Fc段上,抗体结合点暴露于外,因此抗体的包被一般均采用直接吸附法。

MK体育(官方)网站 版权所有 地址:上海市嘉定区曹安公路5588号 邮编:201202 电话: 管理登陆
传真:021-58999639 手机:13310162040 联系人:俞燕熙 邮箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 网址:www.w88ij.com ICP备案号:沪ICP备14029423号-1
主营:ELISA试剂盒/MK体育app竞技 /溶液 /MK体育直播高清版最新版 /标准品/化学试剂
点击这里给我发消息
手机:13310162040
Baidu
map