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Plasmid Mini Kit I(1000)
点击次数:936 更新时间:2017-10-17

质粒小量提取试剂盒I型,Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column说明书

上海远慕生物代理不同系列的进口品牌试剂,美国Omega代理商,包含有:M-13单链DNA提取试剂盒,磁珠质粒超大量提取试剂盒,琼脂糖凝胶回收试剂盒,超薄柱型PCR产物纯化试剂盒,96孔过滤板,一次性多道移液枪分装容器,1.2ml带盖固定圆底收集板。其他Omega系列,了解更多进口试剂,请!

 

 

名称:质粒小量提取试剂盒I型

品牌:Omega

供应商:上海远慕

型号:Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column

用途:从小于5ml培养过夜的细菌培养液中纯化约35ug质粒DNA

质粒小量提取试剂盒I型,Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column说明书

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column特性:
简单-硅胶柱过滤操作
快速-在30分钟内完成多个样品的抽提工作
*-

 

 

美国Omega生物技术公司是一家专门从事核酸分离纯化试剂盒研发与生产的企业,是一家zui早以硅胶膜纯化为基础的核酸纯化公司之一,经过长期的不断奋斗和创新,Omega公司在此基础上已经发展出上百种的核酸纯化试剂盒,包括了质粒提取、DNA/RNA纯化、基因组DNA提取、RNA提取、mRNA纯化。特别是在基因组DNA和RNA提取这两个系统中,Omega根据不同材料的特殊性,发展出了一系列针对性相当强的试剂盒,如真菌,植物,昆虫,软体动物,土壤,粪便等样品的DNA/RNA提取试剂盒,因而大大的方便了广大的科研工作者。

 

 

Plasmid Mini Kit I(1000)-v Spin Column提取步骤:

 
1. 样本处理收集已培养1216小时的菌液13ml12000rpm离心1分钟,尽量吸除上清。          注:菌液较多时可以通过多次重复离心将菌体收集到1个离心管中。菌液收集量由菌浓而定收集菌体过多会反而降低裂解效果。 


2. 悬浮向菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ用移液器反复吹打或涡旋振荡器*悬浮细菌细胞沉淀。 


3. 裂解加入250ul溶液Ⅱ于细菌悬液中温和地上下颠倒6~8次,使菌体充分裂解加1管混合1管确保溶液充分、及时的混匀。充分裂解后的菌液会变得相对粘稠为防止DNA断裂避免剧烈混匀操作及裂解时间过长。 


4. 中和加入350ul溶液Ⅲ, 立即温和上下颠倒6~8次充分混匀,加1管混合1管。此时会出现白色絮状沉淀静置2分钟12000rpm离心5分钟,可适当延长至10min。 
注:溶液Ⅲ加入后应立即混匀避免产生局部沉淀。若上清液中仍存在微小白色沉淀,可重复离心后取上清。 

5. 吸附小心地将上清液转移至吸附柱中12000rpm离心30~60秒,弃收集管中废液,然后将吸附柱重新套入废液收集管中。若上清一次加不完,可重复操作转移时不可吸入沉淀此步很重要。


6. 漂洗向吸附柱中加入600ul漂洗液PW使用前请检查是否已加入无水乙醇,12000rpm离30~60秒。 


7. 重复步骤6弃收集管中废液。

 
8. 将吸附柱套于收集管中,10000rpm离心2分钟。

注:此步骤不可省略目的是去除吸附柱中残余的漂洗液因为漂洗液中乙醇的残留会影响后续实验,酶切PCR等。


9. 洗脱将吸附柱置于一干净的1.5ml离心管中向吸附柱膜中央部位悬空滴加50~100ul溶解液TE或灭菌双蒸水,pH值在7.0-8.5,室温静置2~10分钟,12000rpm离心2分钟,即得提取质粒DNA于-20℃保存。

 

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