上海远慕生物科技详细为您讲述小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作要求，注意事项，适用范围，用途，使用说明书等资讯，本司专业供应进口/国产ELISA试剂盒，质粒载体，MK体育直播高清版最新版 血浆，标准品对照品，培养基，抗体，化学试剂，生化试剂，实验耗材，MK体育app竞技 ，其他试剂等，提供ELISA试剂盒免费代测服务，全程提供操作指导，ELISA种属：大鼠，人，小鼠，植物，马，牛，兔，鸡，猪，犬，豚鼠，骆驼及其他动物，本司质粒载体*进行中，咨询！
中文名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒
别名：小鼠白介素6(IL-6)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
产品特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。
产品实验设备：酶标仪， 37℃恒温箱，自动洗板机，可调节移液器以及其吸头，蒸馏水，干净的试管，容量瓶等。
产品应用领域：本ELISA试剂盒限科研，严禁临床使用。
特点：灵敏性高、特异性强、重复性好。
检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
用途：用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒组成：
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 ；
2 酶标试剂 6ml×1 瓶；
3 酶标包被板 12 孔×8 条 ；
4 样品稀释液 6ml×1 瓶；
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 ；
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶；
7 终止液 6ml×1 瓶；
8 标准品（48ng/ml） 0.5ml×1 瓶；
9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶；
10 说明书 1 份；
11 封板膜 2 张；
12 密封袋 1 个；
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安全性：
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作要求准备：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作步骤：
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl， 然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒操作要求注意事项：
1.在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
2.建议新鲜标本收集后尽早检测。1-3天左右检测的样本可储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集标本，请将标本及时分装后放在-20℃或- 70℃条件下保存，避免反复冻融。
3.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
4.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
5.一次加样时间控制在5分钟内.
6.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。
7.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。
8.在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
9.底物请避光保存。
10.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒液体类标本：
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1）血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5）组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
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技术原理：
(1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
(2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
(3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
(4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
(5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
